UTICAJ EKSTRAKATA GLJIVE INONOTUS OBLIQUUS NA FORMIRANJE BIOFILMA PATOGENIH BAKTERIJA

Abstract

Inonotus obliquus (Čaga) je medicinski značajna glјiva čija micelija je tamne boje, a razvija se u kori breze. Pripada porodici Hymenochaetaceae. Ekstrakti I. obliquus koriste se širom Severne i Istočne Evrope, Koreje i Rusije jer se pretpostavlјa da pokazuju anitimikrobne, antioksidativne, antiinflamatorne i antitumorske aktivnosti. Hemijski testovi pokazuju da I. obliquus proizvodi širok spektar sekundarnih metabolita, uklјučujući fenolna jedinjenja, melanine, uglјene hidrate i proteine. Zadatak ovog istraživanja je bio da se utvrdi hemijski sastav, kao i antimikrobna i antiadhezivna i antibiofilmska sposobnost dobijenih subkritičnih vodenih ekstrakata I. obliquus poreklom iz Mongolije (IM) i sa planine Vlasina, Srbija (IS). Utvrđen je ukupan sadržaj proteina, uglјenih hidrata i fenola, a visok sadržaj fenola u oba ekstrakta. Fenolne kiseline su identifikovane hemijskom analizom HPLC i potvrđeno je prisustvo hlorogenske kiseline u najvećoj koncentraciji, katehina, p-kumarinske kiseline i cimetne kiseline. Antimikrobni potencijal subkritičnih vodenih ekstrakata ispitan je mikrodilucionom metodom. Antiadhezivna i antibiofilmska sposobnost praćena je korišćenjem Gram pozitivnih bakterija Listeria monocitogenes, Enterococcus faecalis i Staphilococcus aureus, kao i Gram negativnih Salmonella enteritidis, Escherichia coli i Pseudomonas aeruginosa. Najznačajnija proizvodnja biofilma zabeležena je kod E. faecalis (treća kategorija) i S. aureus (druga kategorija). Uočeno je da su ekstrakti IS i IM doveli do 90% adhezije kod E. faecalis i S. aureus kao i do redukcije biofilma, odnosno da je došlo do smanje sposobnost ove dve bakterije da formiraju biofilm. Gram pozitivne bakterije su se pokazale kao osetlјivije u prisustvu oba testirana subkritična vodena ekstrakta (MBC - 20 mg/mL u svim eksperimentima). Prema dobijenim vrednostima MIC, IM (5 mg/mL, 2,5 mg/mL, 2,5 mg/mL) je ispolјio jači efekat od IS (10mg/mL, 5 mg/mL, 5 mg/mL) na L. monocitogenes, E. faecalis i S. aureus. Ova istraživanja pokazala su da su testirani subkritični vodeni ekstrakti I. obliquus veoma efikasni u sprečavanju nastanka biofilma, posebno onih odabranih Gram-pozitivnih bakterija. Ovo otkriće bi moglo biti veoma korisno u borbi protiv biofilma, uzimajući u obzir sve probleme i opasnosti koje oni nose.